Mykologická vyšetření

1. Dg. Povrchových mykóz

Odběry materiálu od pacientů s podezřením na dermatomykózu:
kožní šupiny / nehty / krusty,hnis / obsahy puchýřů / pozměněné chlupy a vlasy / podnehtové hyperketarózy / bioptický materiál

Pro laboratoř je cenná poznámka lékaře o styku nemocného s půdou či zvířetem
a přesná lokalizace ložiska dermatomykózy.

Upozornění - U dermatomykóz musí být pacient nejméně 14 dní bez antimykotické lokální terapie a u onychomykóz nejméně 30 dní. Falešně negativní výsledek kultivace je způsoben sníženou životaschopností mykotického agens v důsledku aplikace antimykotik.

Sterilní zkumavka pro odběr povrchových mykóz

Postup při odběru: Odběr provést sterilními nástroji (jehlou,
pinzetou, skalpelem) do sterilních zkumavek s dokonalým
uzávěrem, dodávané naší laboratoří.

V případě Vašeho požadavku je možné provést odběry po dohodě v naší laboratoři.

Budova zdravotnického centra	Laboratoř v suterénu budovy

Zásady správného odběru:
Správně provedený odběr materiálu a jeho včasné odeslání k vyšetření je základním předpokladem pro spolehlivý průkaz mykotických infekcí.
- vzorek musí být adekvátní lokalizaci a formě onemocnění a musí být získán
v dostatečném množství
- vzorky klinického materiálu se odbírají do sterilní zkumavky tak, aby nedocházelo
ke kontaminaci z okolí
- materiál je vždy výhodné odebírat před zahájením terapie
- materiál se nesmí odebírat do fixačních nebo konzervačních roztoků

U mykóz kůže - doporučujeme odebírat kožní šupiny z okrajů lezí.
U onychomykóz - doporučujeme odebírat částečky podnehtové hyperkeratózy.
U mykóz vlasových a ochlupených oblastí doporučujeme zasílat postižené vlasy a vousy s folikulární částí.

Upozornění
Nesprávně provedený odběr může ovlivnit výsledek laboratorního vyšetření.
K nejčastějším chybám při odběru patří zejména:
1. Nedostatečné množství odebraného materiálu (je nutné počítat s různým zpracováním v laboratoři).
2. Velké kusy celých nebo odstřihaných částí nehtu.
3. Odběry nalakovaných nehtů.

Zpracování v laboratoři:
- mikroskopický průkaz v UV záření
- kultivační průkaz
- dourčení dermatophyta, kvasinky nebo sapr. plísně
- citlivost

Citlivost na ATB	Kultivace mykóz	Stojánek - mykologie

Výsledky:
Předběžný výsledek mikroskopie do 24 hodin
Kultivace 14 -21 dnů
Poznámka: Vedle mykologie je v některých případech vhodné provést i vyšetření bakteriologické.

 

2. Dg. Slizničních a orgánových mykóz - Přímý kultivační průkaz patogena (agens)

Odběry materiálu na přímý průkaz houbového agens:
- sputum
- bronchiální laváž
- moč
- liquor
- hemokultura
- stěry z různých lokalizací

Postup při odběru: k odběru používáme sterilní odběrové soupravy. Tekutý materiál popř. kousky tkání odebíráme do sterilních zkumavek s dokonalým uzávěrem.

Sterilní kontejner na odběry	Sterilní zkumavka na odběry	Transport. půda Stuartova - černá

Zásady správného odběru:
Správně provedený odběr materiálu a jeho včasné odeslání k vyšetření je základním předpokladem pro spolehlivý průkaz mykotických infekcí
- vzorek musí být adekvátní lokalizaci a formě onemocnění a musí být získán
v dostatečném množství
- vzorky klinického materiálu se odbírají do sterilní zkumavky tak, aby nedocházelo ke
kontaminaci z okolí
- materiál je vždy výhodné odebírat před zahájením terapie
- materiál se nesmí odebírat do fixačních nebo konzervačních roztoků

Zpracování v laboratoři:
- přímý mikroskopický průkaz
- kultivační průkaz
- kvantitativní stanovení houbového agens
- citlivost kvalitativní

Detekční destička	Candida Albicans

Výsledky:
mikroskopie - ihned po doručení do laboratoře
kultivace - do 10ti dnů

Výsledky Dg. slizničních mykóz

Hodnocení mykóz sliznic a vnitřních orgánů

Materiál	Hodnocení
Hemokultury, mok	Důležitý každý nález
Sputum	Závažný nález - kvasinkové organizmy 10.5 a více Hyfomycety-růst při 37 °C Důležité opakování
Moč	Závažný nález 10.4 a více U žen je důležité vyšetřit poševní prostředí na přítomnost houbového agen
Výtěry	Nález 10.4 zárodků a více
Stolice	Nález 10.5 zárodků a více

Mikroskopie - pozitivní je nález mycelinových vláken nebo spor.

Poznámka: Vedle mykologie je v některých případech vhodné provést současně
i vyšetření bakteriologické.

Upozornění:
Tato diagnostika je často opomíjena, protože klinický projev není typický.
Důležité je na tuto infekci myslet u imunodeficitních pacientů, u dlouhodobě léčených ATB, bez výrazného efektu léčby cytostatiky a starších osob s jiným základním onemocněním.

 

3. Mykologická sérologie

Odbíraný matriál: krev, liguor, moč, bal

Zkumavka pro odběr krve

Zpracování v laboratoři:
- Přímý průkaz kvasinkového a aspergilového antigenu
- Nepřímý sérologický průkaz protilátek

Metody zpracování, používané sety a interpretace výsledků:
1. Aglutinace
Průkaz protilátek proti C.albicans
Hodnocení - hraniční titr 1:160

2. Hemaglutinace
Průkaz protilátek proti C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. glabrata ve třídách IgG, IgM, IgA.
Používané sety - LD Canidida Hemkit IHA
Hodnocení - hraniční titr 1:320

Průkaz protilátek proti Aspergillus fumigatus v třídách IgM, IgG, IgA.
Používané sety - LD Aspergillus Hemkit IHA
Hodnocení - hraniční titr 1:40

DLD Canidida Hemkit IHA	LD Aspergillus Hemkit IHA

3. Přímý průkaz houbového antigenu - latexová aglutinace
Průkaz kvasinkového Ag. (kvalitativní + kvantitativní)
Používané sety - Ramco Cand Tec
Hodnocení - kvantitativní, hraniční titr 1:2 a více

Ramco Cand Tec

Průkaz aspergillového Ag.
Používané sety - Aspergillus Pastorex
Hodnocení - positivní / negativní

4. Precipitace
Průkaz protilátek proti - somatickému a metabolickému antigenu C. albicans
Průkaz protilátek proti - Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus nidulans,
Aspergillus flavus, Aspergillus terreus

Hodnocení - na křížky
+ nespecifická reakce - vhodné opakovat
++ a více svědčí o orgánovém postižení

Výsledky - mykologická serologie

Výsledky: předběžné - do 24 hodin
konečné - do 3 dnů

Poznámka k výsledkům:
Pokud je při aglutinaci dosažen opakovaně nižší titr a při precipitaci hodnocení na ++ a více, výsledek svědčí o prodělané nebo probíhající infekci kvasinkové nebo aspergilové.

POZOR !!
Jako u všech sérologických reakcí i u uvedených platí zásada, že jedno vyšetření je nedostačující a je proto vhodné vyšetření opakovat. Titr může ale přesto zůstat stejný, protože na onemocnění houbové etiologie se začíná myslet pozdě, tzn. onemocnění kulminuje a titr dosahuje nejvyšší hodnoty.
Protože houbová agens platí mezi oportunní, jsou nejvíce ohroženy osoby imunodeficitní, oslabené jiným základním onemocněním, po dlouhé terapii ATB, kortikoidy, cytostatiky, atd. (tyto osoby nemusí vždy tvořit protilátky).
Tato diagnostika je často opomíjena, protože klinický projev není typický.